三次装柱，条带从 3 处明显 → 被前平衡洗去
与阴离子使用同一套利穗设备体系（层析柱、层析系统、匀浆罐），阳离子层析共进行三次装柱。第一次 0.01M NaOH 保存隔天发现 3 处明显条带；第二次模拟生产 0.5M NaOH 前消毒 + 含盐再生液冲洗出现 2 处较浅条带；第三次生产含盐预平衡出现极浅痕迹并被前平衡洗去，此后 Cycle2 全程无异常。阳离子按原设备完成本批次生产。
03.1事件经过 — 三次装柱
装柱前设备排查处理 → 第 1 次装柱发现条带 → 1mM HCl 淘洗 + 多轮设备再处理 → 第 2 次装柱 + 模拟生产（条带较浅）→ 喷淋球锈迹补充发现 → 第 3 次装柱 + 正式生产（条带被洗去）。
03.2设备方向调查
3.2.1 阳离子层析柱排查
2026.07.02–07.11 预防性拆解排查，此后第二、三次装柱前又进行多轮拆卸检查：
- 首次排查：筛板锈点/黑点、下导流板颗粒物、上法兰油污状污渍、下法兰螺孔锈点、上密封圈黄斑（以弱酸擦洗处理）；
- 下柱头四位两通阀：隔膜阀安装位置发现红锈和膜片老化，已对红锈进行处理并更换老化垫圈及膜片；
- 2026.07.24–07.25 复检：除下端阀门外，未发现不锈钢部件生锈现象；
- 2026.07.27 晚：下端阀门拆卸检查发现生锈，现场白布擦拭无法去除，对该阀门进行酸洗处理后水冲复原。
3.2.2 阳离子层析系统排查
2026.07.09 完成酸洗钝化（室温）；2026.07.24–07.25 再次酸洗钝化（控温），酸洗钝化记录见附件 23。
结论：层析系统经多轮酸洗钝化处理，层析系统内部管路释放铁离子的风险逐次减少 — 第一次室温钝化后第一次装柱出现黄色条带；控温钝化并配合填料多轮清洗后，第二次装柱出现略浅的黄色条带；第三次装柱前在预平衡步骤出现极浅条带并在前平衡步骤被洗去。
3.2.3 匀浆罐排查
阳离子层析与亲和、阴离子层析使用的是同一个利穗 500L 匀浆罐，相关排查内容见 阴离子 2.2.4。补充要点：
- 2026.07.24 拆检发现筛网分流板侧面一处锈迹，酸洗钝化并热碱超声清洗后回装。
- 2026.07.27 再次拆检发现 CIP 喷淋球黄色锈迹及层析柱下端阀门生锈（均为此前排查遗漏部位）。
- 对匀浆罐整体进行酸洗钝化，对喷淋球单独酸洗钝化。
03.3溶液方向调查
对阳离子工序涉及的 WFI、0.01M NaOH 等溶液取样送检金属元素：铁元素含量极低，满足标准（附件 24）。结论：溶液中铁元素含量极低，溶液引入铁元素的风险极小，排除溶液为条带铁来源。
03.4填料方向调查
3.4.1 黄色条带冲洗验证
填料冲洗/酸洗验证效果
柱内 WFI/弱酸冲洗对条带无明显效果，而匀浆状态下 1mM HCl 浸泡 3h 可有效洗去铁离子（处理后送检铁元素未检出）。
条带物质与填料结合牢固，柱内水洗及弱酸冲洗均难以去除，说明铁离子与填料配基发生了较强结合。
而匀浆状态下 1mM HCl 浸泡 3.5h 可有效去除填料上结合的铁离子（pH 不低于 3，符合 Cytiva 建议），处理后送检铁元素未检出。
这一对照结果同时验证：(1) 填料清洗方案有效；(2) 条带物质为可被酸洗脱的铁离子结合物。
3.4.2 阳离子黄色填料金属元素检测
阳离子黄色填料中铁元素较未开封新填料含量偏高约 5 倍以上，铬、锰同步升高（附件 24）。
03.5三次装柱条带递减趋势与出现条件分析
三次装柱条带程度呈递减趋势（3 处明显 → 2 处较浅 → 1 条极浅并被洗去），与设备多轮酸洗钝化（室温 → 控温 → 含遗漏部件补充处理）及填料多轮清洗置换（WFI 置换 → 1mM HCl 酸洗 + 1M NaCl 置换 → 5 种溶液 8 次清洗）的处理过程相对应。
将阴离子两次装柱、阳离子三次装柱共 5 次条带出现时的溶液体系统一梳理如下表：
| 事件 / 装柱批次 | 条带出现时溶液体系 / 含 NaCl | 条带出现前接触的溶液序列（节选） | 出现后的冲洗措施 | 冲洗结果 |
|---|---|---|---|---|
| 06.25 阴离子第 1 次装柱 |
0.4M NaCl 前平衡 含 NaCl |
20% 乙醇/0.01M NaOH 封存约 3 年 → 06.12 系统清洗 → 06.25 二次清洗 → WFI 匀浆装柱 → 反冲 1CV WFI → 正冲 2CV WFI（未见条带）→ 0.4M NaCl 前平衡 2CV（发现条带） | 完成柱效测试后进入偏差调查、拆柱排查 | 冲不掉 |
| 07.10 阴离子第 2 次装柱 |
0.4M NaCl 前平衡 含 NaCl |
07.08–09 系统酸性钝化（室温，未控温）+ 配件返厂钝化 → 07.10 清洗 + 清洁确认 → WFI 冲洗（未见异常）→ 0.4M NaCl 平衡（条带再现且增多） | 07.11 拆柱将填料抽回匀浆罐；1M NaCl 循环冲洗 2h | 冲不掉 |
| 07.16 阳离子第 1 次装柱 |
发现时柱内为 0.01M NaOH 保存液 不含 NaCl |
07.14 1M NaCl 循环冲洗 2h + WFI 冲洗至电导 0mS/cm → 匀浆罐 CIP → 07.15 WFI 置换 2 次 + 装柱 → 柱效 0.4M NaCl → 1M NaCl → 3CV WFI → 2CV 0.01M NaOH 保存 | 07.16 晚 WFI 冲洗 12CV + 07.18 50mM HAc (pH3) 冲洗 10CV + 浸泡 15min | 冲不掉 |
| 07.27 阳离子第 2 次装柱 |
前消毒 0.5M NaOH + 再生 50mM HAc-NaAc + 0.5M NaCl pH 5.0 再生含 NaCl |
07.20–21 填料 1mM HCl 酸洗 3.5h + 0.5M NaOH 中和 + WFI 置换 + 20% 乙醇分装 → 07.24–25 系统再次酸洗钝化（控温）+ 柱拆检 + 匀浆罐拆检 + 07.25–26 填料 1M NaCl 置换 4 次 | 模拟生产最后使用 3CV WFI 置换再生液 | 冲不掉 |
| 07.29 阳离子第 3 次装柱 + 正式生产 |
预平衡含盐 → 前平衡不含盐 不含 NaCl 洗去 |
07.27 喷淋球 CIP200 酸洗钝化 + 整体酸洗钝化 + 07.27–28 填料 5 种溶液 8 次淘洗（HAc-NaAc+NaCl → WFI → 1M NaCl → 0.5M NaOH → WFI）→ 07.28 装柱柱效合格 → 0.01M NaOH 保存 | Cycle1 前平衡 50mM HAc-NaAc pH5.0（不含 NaCl）冲洗 | 消失（冲掉） |
03.6确认的现象 / 排除的可能
- 阳离子黄色填料中铁含量约为新填料的 5 倍以上，铬、锰同步升高，与阴离子偏差为同一类物质。
- 三次装柱条带呈递减趋势（3 处明显 → 2 处较浅 → 1 条极浅并被洗去），与设备多轮酸洗钝化、填料多轮清洗置换对应。
- 条带出现时机具有一致规律：含盐（NaCl）或碱（NaOH）溶液条件下出现或显现。
- 阳离子层析柱、层析系统、匀浆罐均发现过客观锈迹，且存在排查遗漏部位（下端阀门、喷淋球）。
- 条带物质与填料结合牢固（柱内水洗、弱酸冲洗不消失），但可被匀浆状态下 1mM HCl 浸泡洗脱（处理后铁离子未检出）。
- 配制溶液引入：各溶液送检铁元素含量极低（附件 24）。
- 人员因素：操作人员均经培训持证上岗，操作符合 SOP。